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本文標題："使用熒光顯微技術觀察和測定細胞膜的光源特點"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2013-11-3 20:07:19 本站主頁地址：http://www.bailemeng6.cn
使用熒光顯微技術觀察和測定細胞膜的光源特點
熒光技術在細胞膜研究上的應用
熒光技術在細胞膜與膜蛋白的研究上主要有熒光共振能量轉移
(FRET-fluorescent resonance energy transfer)、熒光淬熄(fluorescence quenching)、光漂白
熒光回復(FRAP -fluorescence recovery after photobleaching)與熒光顯微技術
(fluorescence microscopy technique)。
FRET原理是一熒光物質(donor)受到特定波長的光線照射后會被激發(fā)而發(fā)出另一
特定波長的光，此能量轉移的距離約7-10 nm，在此距離內若有一接收者
(acceptor)則此能量會被吸收，而熒光減弱。FRET廣泛應用于膜蛋白的研究
藉由donor與acceptor標識在欲觀察的分子上，便可由熒光強弱知道兩種
分子結合與混合程度。Fluorescence quenching與FRET的原理類似，這類熒光分
子在高濃度(~70mM)彼此距離接近時會發(fā)生分子之間會發(fā)生self-quenching的現
象而讓熒光減弱，而在低濃度時熒光較強。
Fluorescence quenching經常被運用到微胞泄漏實驗，
當細胞膜上有破洞產生時，如果熒光分子外泄則濃度降低，
因而造成熒光強度變化。
FRAP的原理是在細胞膜的局部區(qū)域, 以激光光源集中激發(fā)局部區(qū)域,
讓其造成分子局部的熒光漂白，再來測量熒光回復的速度
而從回復的速度可以知道脂質分子擴散速率，進而了解細胞膜相變的機制
相較于前面所提的熒光技術，熒光顯微技術是一個能夠直接、及時觀察細胞膜上
變化的技術。當人造膜上有兩種區(qū)塊共存時，被標識的熒光分子會選擇停留在特
定的區(qū)塊而產生熒光分部不均勻，
來提供足夠的反差來觀察人造膜上區(qū)塊尺寸大小、形狀與動態(tài)行為
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