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單層生長的培養(yǎng)細胞使用的是球磨式勻漿器
單層生長的培養(yǎng)細胞常常在等滲介質(zhì)下使用緊密配置的Doun。e勻
漿器(全玻璃材質(zhì))進行破裂,但使用頻繁且對任何培養(yǎng)細胞效率都
更高的則是球磨式勻漿器(細胞破碎機)或數(shù)次通過25號注射器針頭
的方法。球磨式勻漿器不僅在破碎細胞方面效率更高,同時還可以
保護精細的細胞器如溶酶體一些懸浮培養(yǎng)細胞,特別是核質(zhì)體積比
很高的,比如淋巴細胞或Jurkat細胞,如果不先用相當?shù)蜐B的介質(zhì)
進行溶脹的話,通常無論用什么方法都無法破碎。這就意味著很可
能介質(zhì)對于細胞器分離本身并不是像理想中那么適合的。該方法使
用了低滲醋酸鎂溶液,結(jié)合了將介質(zhì)可能造成的有害效應降到最小
的策略。細胞在大體積緩沖液中溶脹后,進行沉淀,在進行勻漿化
之前除去大部分的液體。這樣~來,等滲胞質(zhì)溶膠的稀釋保持在了
最小限度,可以對釋放出來的細胞器提供一定的保護。進一步的保
護可通過立即加入高滲介質(zhì)將勻漿液回復到等滲條件獲得。這種方
法可用于任何低滲介質(zhì)的方案中。然而,通常情況下會退而求其次
先沉淀細胞器再用等滲介質(zhì)制成混懸液。
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